Cómo hacer una solución tampón Tris para uso médico o de laboratorio

Las soluciones tampón son líquidos a base de agua que incluyen tanto un ácido débil como su base conjugada. Debido a su química, las soluciones tampón pueden mantener el pH (acidez) a un nivel casi constante incluso cuando se producen cambios químicos. Los sistemas de amortiguación se producen en la naturaleza, pero también son extremadamente útiles en química..

Usos para soluciones tampón

En los sistemas orgánicos, las soluciones tampón naturales mantienen el pH a un nivel constante, lo que hace posible que ocurran reacciones bioquímicas sin dañar el organismo. Cuando los biólogos estudian procesos biológicos, deben mantener el mismo pH constante; para hacerlo, utilizaron soluciones tampón preparadas. Las soluciones tampón se describieron por primera vez en 1966; muchos de los mismos tampones se usan hoy.  

Para ser útiles, los tampones biológicos deben cumplir varios criterios. Específicamente, deben ser solubles en agua pero no solubles en solventes orgánicos. No deberían poder pasar a través de las membranas celulares. Además, deben ser no tóxicos, inertes y estables a lo largo de cualquier experimento para el que se utilicen..

Las soluciones tampón se producen naturalmente en el plasma sanguíneo, por lo que la sangre mantiene un pH constante entre 7.35 y 7.45. Las soluciones tampón también se usan en:

• procesos de fermentación
• telas moribundas
• análisis químico
• calibración de medidores de pH
• Extracción de ADN

¿Qué es la solución tampón Tris??

Tris es la abreviatura de tris (hidroximetil) aminometano, un compuesto químico que a menudo se usa en solución salina porque es isotónico y no tóxico. Debido a que tiene un Tris, tiene un pKa de 8.1 y un nivel de pH entre 7 y 9, las soluciones tampón de Tris también se usan comúnmente en una variedad de análisis y procedimientos químicos, incluida la extracción de ADN. Es importante saber que el pH en la solución tampón tris cambia con la temperatura de la solución.

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Cómo preparar el tampón Tris

Es fácil encontrar una solución tampón tris disponible comercialmente, pero es posible hacerlo usted mismo con el equipo apropiado.

Materiales:

Calcule la cantidad de cada elemento que necesita en función de la concentración molar de la solución que desea y la cantidad de tampón que necesita.

• tris (hidroximetil) aminometano 
• agua desionizada destilada
• HCl

Procedimiento:

1. Comience por determinar qué concentración (molaridad) y volumen de tampón Tris desea hacer. Por ejemplo, la solución tampón Tris utilizada para solución salina varía de 10 a 100 mM. Una vez que haya decidido lo que está haciendo, calcule la cantidad de moles de Tris que se requieren multiplicando la concentración molar del tampón por el volumen del tampón que se está haciendo. (moles de Tris = mol / L x L)
2. A continuación, determine cuántos gramos de Tris es esto multiplicando el número de moles por el peso molecular de Tris (121.14 g / mol).  gramos de Tris = (moles) x (121.14 g / mol)
3. Disuelva el Tris en el agua desionizada destilada, 1/3 a 1/2 del volumen final deseado.
4. Mezcle HCl (por ejemplo, HCl 1 M) hasta que el medidor de pH le proporcione el pH deseado para su solución tampón Tris.
5. Diluya el tampón con agua para alcanzar el volumen final deseado de solución.

Una vez que la solución se ha preparado, se puede almacenar durante meses en un lugar estéril a temperatura ambiente. La larga vida útil de la solución tampón Tris es posible porque la solución no contiene proteínas.