La prueba de Kastle-Meyer es un método forense económico, fácil y confiable para detectar la presencia de sangre. Aquí es cómo realizar la prueba.
Materiales
Solución de Kastle-Meyer
70 por ciento de etanol
agua destilada o desionizada
3 por ciento de peróxido de hidrógeno
cotonetes
gotero o pipeta
una muestra de sangre seca
Realice los pasos de la prueba de sangre de Kastle-Meyer
Humedezca un hisopo con agua y tóquelo con una muestra de sangre seca. No necesita frotar con fuerza ni cubrir la torunda con la muestra. Solo necesitas una pequeña cantidad.
Agregue una gota o dos de etanol al 70 por ciento a la torunda. No necesita remojar el hisopo. El alcohol no participa en la reacción, pero sirve para exponer la hemoglobina en la sangre para que pueda reaccionar más completamente y aumentar la sensibilidad de la prueba..
Agregue una o dos gotas de la solución de Kastle-Meyer. Esta es una solución de fenolftaleína, que debe ser incolora o de color amarillo pálido. Si la solución es rosada o si se vuelve rosada cuando se agrega al hisopo, entonces la solución es vieja u oxidada y la prueba no funcionará. El hisopo debe ser incoloro o pálido en este punto. Si cambió de color, comience nuevamente con alguna solución nueva de Kastle-Meyer.
Agregue una o dos gotas de solución de peróxido de hidrógeno. Si el hisopo se vuelve rosado inmediatamente, Esta es una prueba positiva para la sangre. Si el color no cambia, la muestra no contiene una cantidad detectable de sangre. Tenga en cuenta que el hisopo cambiará de color y se volverá rosado después de unos 30 segundos, incluso si no hay sangre presente. Esto es el resultado de que el peróxido de hidrógeno oxida la fenolftaleína en la solución indicadora..
Metodo alternativo
En lugar de humedecer el hisopo con agua, la prueba se puede realizar humedeciendo el hisopo con la solución de alcohol. El resto del procedimiento sigue siendo el mismo. Esta es una prueba no destructiva, que deja la muestra en una condición tal que puede analizarse usando otros métodos. En la práctica real, es más común recolectar una muestra nueva para pruebas adicionales..
Prueba de sensibilidad y limitaciones
El análisis de sangre de Kastle-Meyer es una prueba extremadamente sensible, capaz de detectar diluciones de sangre tan bajas como 1:10.7 7. Si el resultado de la prueba es negativo, es una prueba razonable de que el hemo (un ingrediente en toda la sangre) está ausente en la muestra. Sin embargo, la prueba dará un resultado falso positivo en presencia de un agente oxidante en la muestra. Los ejemplos incluyen peroxidasas que se encuentran naturalmente en la coliflor o el brócoli. Además, es importante tener en cuenta que la prueba no diferencia entre moléculas de hemo de diferentes especies. Se requiere una prueba por separado para determinar si la sangre es de origen humano o animal.
Cómo funciona la prueba
La solución de Kastle-Meyer es una solución indicadora de fenolftaleína que se ha reducido, generalmente al reaccionar con zinc en polvo. La base de la prueba es que la actividad similar a la peroxidasa de la hemoglobina en la sangre cataliza la oxidación de la fenolftaleína reducida incolora en fenolftaleína rosa brillante.